產品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠下丘腦組織、血清、血漿及腦組織勻漿中的 AGRP 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于食欲調控、能量代謝、肥胖模型、下丘腦攝食環路及內分泌代謝研究。
產品名稱:大鼠Agouti相關蛋白(AGRP)elisa試劑盒
英文名稱:AGRP ELISA Kit
產品規格:48T/96T
貨號:CS-6239E
檢測原理:
大鼠Agouti相關蛋白(AGRP) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 AGRP 抗體。
結合:加入標準品或樣本,AGRP 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 AGRP 抗體和 HRP 標記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:
1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔,精準加樣,封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數加終止液變色穩定后,立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合,換算樣本濃度。