產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用比濁法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清中的補(bǔ)體溶血活性（AH50）。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 CH50U/mL，靈敏度達(dá) 0.16 CH50U/mL，適用于補(bǔ)體系統(tǒng)整體功能、免疫缺陷病、感染性疾病及自身免疫病研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：(AH50)elisa試劑盒
英文名稱：AH50 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號(hào)：CS-6043E
檢測(cè)原理：
大鼠補(bǔ)體溶血活性 (AH50) ELISA 試劑盒的原理是?比濁法?，通過補(bǔ)體介導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血反應(yīng)，利用吸光度變化來定量檢測(cè)補(bǔ)體的整體溶血活性。
?固相化?：微孔板預(yù)先包被綿羊紅細(xì)胞懸液與抗體的復(fù)合物。
?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，補(bǔ)體與復(fù)合物結(jié)合并激活補(bǔ)體溶菌通路。
?檢測(cè)?：紅細(xì)胞發(fā)生溶血，釋放血紅蛋白，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度變化。
?顯色?：無需額外底物，直接通過血紅蛋白的吸光度變化反映溶血程度。
?測(cè)定?：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，活性與 OD 值成正比。
實(shí)驗(yàn)步驟?：
?1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。
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操作步驟?：
?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。
?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。
?2、加樣與孵育?：
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。
輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準(zhǔn)）。
?3、洗滌?：
棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。
4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?：
同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。
6?、顯色?：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測(cè)定?：
每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。
在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。
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