產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、腸道組織及腦組織勻漿中的 GLP-1 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于腸促胰素、血糖調(diào)控、攝食抑制、糖尿病及代謝綜合征研究。
產(chǎn)品名稱:小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱:GLP-1 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號(hào):CS-MS585
檢測(cè)原理:

小鼠胰高血糖素樣肽1 (GLP-1) 酶聯(lián)免疫試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過(guò)固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗小鼠 GLP-1 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,GLP-1 被固相抗體捕獲。
檢測(cè):加入化的抗小鼠 GLP-1 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?:

1.加樣孵育
每孔精準(zhǔn)加入 100μL 對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測(cè)樣本,空白孔加等量樣本稀釋液;貼封板膜密封微孔板,置于 37℃恒溫孵育箱,避光孵育 90min,保證抗原抗體充分結(jié)合。
2.洗板
輕柔棄去孔內(nèi)液體,吸水紙上快速拍干;每孔加滿洗滌工作液,靜置浸泡 30s,甩干拍凈;重復(fù)洗滌5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì),降低背景值。
3.加酶結(jié)合物孵育
除空白孔外,每孔加入 100μL HRP 標(biāo)記特異性檢測(cè)抗體;輕微水平晃板混勻,重新封板,37℃避光恒溫孵育 60min。
4.二次洗板
重復(fù)上述洗板操作 5 次,嚴(yán)格拍干孔內(nèi)殘留液體,杜絕殘留洗液造成假陽(yáng)性、數(shù)據(jù)偏差。
5.底物顯色
避光條件下,每孔加入 90μL TMB 底物顯色液,輕柔混勻;37℃避光精準(zhǔn)孵育 10~15min,此時(shí)液體逐步顯現(xiàn)藍(lán)色,顯色深淺與待測(cè)物含量正相關(guān)。
6.反應(yīng)終止
嚴(yán)格遵循加樣順序,每孔快速加入 50μL 酸性終止液,輕晃微孔板充分混勻,藍(lán)色即刻轉(zhuǎn)為黃色,終止酶促顯色反應(yīng)。
7.上機(jī)讀數(shù)檢測(cè)
加終止液后15min 內(nèi),用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔 450nm 波長(zhǎng)吸光度(OD 值);以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,擬合方程計(jì)算待測(cè)樣本目標(biāo)蛋白濃度。