本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠間充質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、損傷組織、血清及細(xì)胞裂解液中的 VIM 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于細(xì)胞骨架重塑、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、組織損傷、纖維化及腫瘤侵襲研究。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠波形蛋白(VIM)elisa試劑盒 | 英文名稱 | VIM ELISA Kit |
貨號 | CS-6044E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 VIM 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,VIM 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 VIM 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本處理
1) 血清:無菌無熱源采集,避免溶血 / 脂血;1000×g 離心 10 min 取上清,-20℃分裝,禁反復(fù)凍融。
2) 血漿:EDTA / 檸檬酸鹽抗凝(慎用肝素),離心分離上清。
3) 細(xì)胞上清:1000×g 離心除碎片,-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿:預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿,高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴(yán)禁加NaN3抑制 HRP 活性;杜絕溶血、渾濁、污染樣本;全程低溫防降解;超標(biāo)樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋,實驗建議設(shè)置復(fù)孔。
操作步驟:

1. 試劑回溫至 20–25℃,稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min,加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值,擬合曲線算濃度。
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