本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的 CC16 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于氣道上皮損傷、肺部炎癥、肺屏障功能及呼吸系統(tǒng)病變評價(jià)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)elisa試劑盒 | 英文名稱 | CC16 ELISA Kit |
貨號 | CS-5682E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理:
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 CC16 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,CC16 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 CC16 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:
1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細(xì)胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項(xiàng)
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動,建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟:
關(guān)鍵實(shí)操技巧
1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統(tǒng)一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝;時(shí)間嚴(yán)格卡死,過長背景高、過短信號低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規(guī)范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復(fù)凍融;嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數(shù)
全避光;整板顯色時(shí)長一致;加終止液立刻讀數(shù),放置越久數(shù)值漂移越大。
6.基礎(chǔ)質(zhì)控
樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復(fù)開蓋失效。
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