產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠毛囊上皮、皮膚組織、毛發(fā)結(jié)構(gòu)及上皮細(xì)胞勻漿中的 KRT71 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于毛發(fā)發(fā)育、毛囊結(jié)構(gòu)、皮膚屏障、上皮分化及皮膚疾病模型研究。
產(chǎn)品名稱：大鼠II型角蛋白,細(xì)胞骨架71elisa試劑盒
英文名稱:KRT71 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
貨號(hào):CS-6188E
檢測(cè)原理：
大鼠II型角蛋白,細(xì)胞骨架71 elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過(guò)固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 KRT71 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，KRT71 被固相抗體捕獲。
檢測(cè)：加入化的抗大鼠 KRT71 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?：
1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說(shuō)明書進(jìn)行梯度稀釋，配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
2.實(shí)驗(yàn)流程
加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品，37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體：除空白孔外，每孔加入酶標(biāo)抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。
洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復(fù)洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。
顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。
終止：每孔加入終止液，混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。
檢測(cè)：在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定各孔 OD 值，15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
3.關(guān)鍵提示
實(shí)驗(yàn)全程嚴(yán)格控溫，孵育時(shí)使用封板膜避免蒸發(fā)。
洗滌需充分，否則易造成高背景、結(jié)果偏差。
顯色液需避光，終止順序與加樣順序保持一致，確保充分混勻。
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